El pasado 21 de marzo los estudiantes del programa BioMinds, tuvimos la oportunidad de compartir nuestros hallazgos investigativos en el “BioMinds Research Day”. Para mi esta oportunidad fue una experiencia única y enriquecedora. Durante la actividad contamos con la visita de profesionales de Amgen y Abbott ofreciendo sus conferencias, además de que aprendimos sobre hallazgos científicos en otras áreas de otros compañeros pertenecientes al programa. Esta experiencia fue muy importante para mí, ya que fue la primera vez que realice una presentación de poster investigativo y estoy más que segura que no será la última!!!

Me gustaría añadir que la sesión de 30 minutos que se nos dio para evaluar los afiches no fue suficiente, tenía que estar pendiente al reloj y al final de la segunda sesión mi compañero no había terminado de explicar su poster nos “botaron” del lugar. Considere esto como una falta de respeto hacia los compañeros que estábamos presentes presentando los trabajos que hemos estado realizando por alrededor de un año y medio. Creo que es una crítica constructiva que pudieran tomar para las próximas BioMentes: mejor organización en la parte de presentación de afiches.

Como parte de la actividad se nos asignó visitar afiches investigativos de 3 compañeros del programa. De tal forma que los evaluáramos y conociéramos acerca de su contribución científica. Considero que los poster hechos por mis compañeros estaban completos con todas las partes que exigía el programa para la preparación del poster. Todo se entendía claramente y lucia muy profesional. Ellos tenían gran conocimiento acerca del tema y pudieron transmitir sus conocimientos a través de la explicación del poster.

A continuación les escribo un breve resumen de los tres afiches investigativos que logre visitar y evaluar.

Primer afiche:

Estudiante: Aslin M. Rodriguez-Nassif

Methodology to assess the inhibition of α-Amylase by

Tapeinochilus ananassae extracts

El trabajo realizado por ésta estudiante trataba sobre la utilización de dicha planta (Tapeinochilus ananassae) para pacientes diabéticos y sus posibles efectos.  Su estudio fue basado en el análisis de que la obesidad es una variable importante en la diabetes y que para el manejo de la misma se ha sugerido como estrategia la inhibición de α-amilasa para reducir los niveles de azúcar en la sangre.  Utilizó dicha planta, examinando la inhibición de la enzima por extractos acuosos y metanólicos.  También hizo extractos con el flavonoide Quercetin y acarbosa (controles).  Con los extractos se calculó el porciento de inhibición de α-amilasa y se encontró que los extractos acuosos y metanólicos tuvieron una relación inversa en cuanto a la respuesta de inhibición enzimática (medida por concentración).

Segundo Afiche:

Estudiante: Iliane Miranda Fonseca

Searching for bioprospects that degrades complex substrates as targets for Genetic and metabolic engineering

El trabajo realizado por ésta estudiante trata sobre la investigación relacionada a energía alternativa. El propósito de su investigación es poder identificar bacterias que sean capaces de degradar compuestos complejos como por ejemplo: la celulosa y el almidón, para ser convertidos en azúcares simples y así puedan ser utilizados como materia prima para la producción de bio-combustible. Actualmente si han encontrado microorganismos que selectivamente pueden degradar diferentes compuestos complejos, pero aún no han podido identificar la identidad de dichos organismos.

Tercer Afiche

Estudiante: Laura Almodovar

Heavy metal removal in wastewater treatment plants

El trabajo realizado por ésta estudiante trata sobre la presencia de microorganismos en el proceso del tratamiento del agua y cómo su presencia puede afectar dicho proceso. Ella trabaja en conjunto con el Dr. Arturo Massol-Deya en las plantas de tratamiento de Mayagüez y Adjuntas. Aún no saben que tipos de organismos pueden estar presentes, sí saben que el efecto varía por la estación del año especialmente en el porciento de eficiencia de remoción de metales. O sea, que la remoción de metales en el proceso de tratamiento de aguas varía de acuerdo a la estación del año, pues en algunas épocas dominan más microorganismos que otros.

Les deseo EXITO a todos!!!!

Considero que en una escala de 1-5 debo clasificar el progreso de mi investigación con un dos, casi llegando a 3. Como había mencionado anteriormente, nos encontrábamos esperando realizar una reunión con otras personas que estarán involucradas de igual forma en el proyecto que voy a estar realizando este semestre. La reunión se llevo a cabo el pasado viernes y estamos dando los toques finales al diseño experimental, para así comenzar a correr el proyecto rápidamente. A pesar de que termino con programa BioMinds este semestre 2009, continuare trabajando con el proyecto durante el verano para asa irme preparando para la maestría.

En cualquier proyecto, trabajo y hasta en los estudios siempre hay obstáculos y retos que afrontar. En mi caso creo que no han sido muchos ya que he contado con la ayuda de mi esposo y compañeros de laboratorio. Algunos de los retos que estoy afrontando es el saber administrar el tiempo. Aunque ya no estoy envuelta como presidenta de la asociación, si estoy envuelta en los estudios (mi último semestre), atendiendo mi casa, mi trabajo y lo mejor de todo…asumiendo el rol de madre. La distribución del tiempo no ha sido fácil ya que todo toma mucho tiempo en especial la investigación. Aun estoy acostumbrándome a este gran cambio, pero he aprendido a mantener un itinerario de las actividades y todo lo que voy a realizar en la semana para así poder organizarme mejor y no desaprovechar el tiempo.

Espero hayan pasado unas excelentes vacaciones y que este nuevo ano les traiga muchos éxitos. Que esté lleno de muchas bendiciones.  Este es nuestro último semestre en el programa de BioMinds, programa que nos ha dado la oportunidad  de trabajar en lo que es la investigación y nos ha ayudado a desarrollar ciertas destrezas importantes para nuestro futuro.

En este nuevo semestre estamos desarrollando nuevos planes. Nos encontramos en la espera de que nos reunamos con las personas que vamos a estar realizando el proyecto, para definir objetivos. Estaremos trabajando nuevamente en el área de la bioingeniería. Ya no estaremos utilizando metales sino polímeros. De igual forma estaremos analizando la proliferación y adhesión de las células de osteoblastos, como método alterno a los implantes con metales como por ejemplo: TiAlV o GammaTiAl.

Esperamos poder implementar el uso de técnicas de biología molecular con el uso de técnicas  de cultivo de tejido.  Este semestre es un gran reto para mí, ya que este seria de los primeros pasos para seguir en mi proyecto de maestría, además de que comencé este año a estrenarme como MAMA. No ha sido fácil, pero se puede. Este es mi último semestre como estudiante sub-graduada, para luego encaminarme a realizar mis logros… PhD!!!!!

Los siguientes tratamientos en la superficie de Ti-6Al-4V no permitieron el crecimiento de células: Anodizado Mane H2SO4,  Anodizado H3PO4, Anodizado  NaH2PO4·2H20, Recubrimiento con Hidroxiapatita, Recubrimiento con Chitosan, Vitrocerámico, Biovidrio (Rec. de ácido poli-láctico con polvos de biovidrio al 3%),  Recubrimiento Biovidrio (Anodizadas por  plasma químico, con edata, fosfato de calcio, cloruro de calcio y silicato de calcio),  Recubrimiento Biovidrio (Anodizadas por  plasma químico, con edata, fosfato de calcio, cloruro de calcio y silicato de calcio.  Con tratamiento hidrotérmico con NaOH), Anodizado por plasma químico con Hidroxiapatita (No tratamiento térmico),  Anodizado por plasma químico con Hidroxiapatita (Con tratamiento térmico). 

 Luego de haber realizado el proceso de cultivo durante dos semanas, se procedió a realizar la fijación para observar las muestras por SEM.  Se pudo observar que el mejor que las muestras utilizadas de Acero inoxidable fueron más efectivas ya que se observo mejor crecimiento y adherencia de las células en el metal. Por otro lado, las muestras utilizadas de Ti-6Al-4V no permitieron el crecimiento de las células ni adherencia de las células. No se pudo observar proliferación de los osteoblastos.  Algunos de los recubrimientos utilizados como tratamientos sobre la superficie de los metales pudieron ser tóxicos para la célula.

         Cabe mencionar que pudo haber algunas variables que contribuyeron como factores de erros durante la realización del experimento. Entre ellas podemos mencionar sobre el manejo de los platos de cultivos y la cantidad de células que se sembraron sobre cada metal.

El progreso de mi investigación ha seguido igual durante el paso de este mes. Me he quedado en cumplir alrededor del 50% de los objetivos propuestos anteriormente. En el laboratorio comencé este semestre aprendiendo nuevas técnicas de biología molecular, muy distinto de lo que es el cultivo de tejido. Estaba haciendo una genoteca,  poniendo en práctica dichas técnicas. De igual manera se me había asignado un proyecto de cultivo de tejido en el cual iba a observar mediante SEM el comportamiento de los osteoblastos HFOb1.19 ante un nuevo material de implante compuesto de hidroxiapatita y algún otro compuesto. La persona nunca se volvió a comunicar con nosotros para explicarle el diseño experimental y tampoco trajo los materiales. Por tal razón estuve un poco molesta al no haber aprovechado ese tiempo de espera en llevar a cabo otro proyecto. Realmente no me gusta el estar dependiendo de otras personas para poder llevar a cabo la investigación.

Por otra parte me encuentro trabajando con otro plásmido pVinculin. Dicho plásmido será transfectado en las células de osteoblastos. Luego de realizar la transfección, estas células se pondrán a crecer en las aleaciones de metales que ya he utilizado anteriormente: gamma TiAl y TiAlV. Luego de cierto periodo de tiempo, mediante el uso de confocal estaremos observando los diferentes puntos focales (que estarán fluoresciendo) de las células al metal. Este tipo de proyecto en el cual me encuentro en progreso ME ENCANTA!!!!…ya que estoy uniendo diferentes técnicas aprendidas de biología molecular y cultivo de tejido.  Aun me encuentro extrayendo DNA del plásmido debido a algunos errores que he cometido.

Como parte de la contribución científica del proyecto cabe mencionar que al observar las células tranfectadas con el plásmido mediante Confocal, será más fácil analizar cómo será la adherencia de la célula al metal observando los puntos focales fluorescentes en la célula. De esta forma podríamos describir en parte como seria la adherencia de las células del hueso humano ante el implante de alguna de estas aleaciones.

               Este semestre he comenzado a aprender diferentes técnicas comúnmente utilizadas en biología molecular. Muy diferente con lo que estaba acostumbrada a trabajar, cultivo de tejido. He estado realizando un tipo genoteca para el laboratorio; cortando plásmidos (pGlu Reverse, PCMV I, pGlu 883AT^- ) con distintas enzimas de restricción. De este modo se realiza el proceso de digestión en el cual se debe ser bastante cuidadoso al manipular las muestras presentes en los microtubos. Además de aprender a realizar una digestión, aprendí a realizar una extracción de DNA utilizando el miniprep. Les cuento que tuve que hacerlo TRES VECES por pequeños errores. La primera vez que realice la extracción se me olvido rotular al final los microtubos!!!!! La segunda vez lo que se extrajo fue DNA genómico y no del plásmido y ya la tercera todo me salió como debería de ser.  No niego que casi lloraba porque no me salían las cosas, pero luego me di cuenta que son cosas por las que uno debe pasar para seguir aprendiendo y tratar de mejorar para volverse un experto en su área. Sé que no soy la única que ha pasado por esta experiencia y que muchos de mis compañeros deben tener varias anécdotas que contar.

               Con relación a mi progreso lo catalogaría con un 3; ya que considero que he logrado al menos el 50% de mis objetivos para este semestre. Sigo puliendo las técnicas aprendidas en cultivo de tejido y he estado aprendiendo nuevas técnicas con relación a biología molecular, pero para mí aun continúan algunos objetivos por cumplir, que son bien importantes. Hemos estado hablando sobre otras posibilidades de que continúe en biología molecular, pero siga trabajando con un software nuevo para analizar la colocalización de las proteínas en las células de osteoblasto. Aun no es seguro, pero luego los pondré al día.

               Gracias a Dios, hasta ahora no he confrontado dificultades con respecto a la realización de mis metas. Al contrario, me siento muy a gusto en el laboratorio trabajando. Hay mucha comunicación entre el grupo de trabajo del laboratorio y la disposición de la Dra. Diffoot, Idaris de Jesús y los demás estudiantes graduados y sub-graduados al momento de uno tener dudad o necesitarlos ha sido siempre. Para explicar o ayudar en cualquier cosita, ellos siempre dicen presente. Estoy súper agradecida de la Dra. Diffoot de haberme dado la oportunidad de trabajar en su laboratorio.

Que pasen un buen día!!! Hasta luego…

           Este próximo semestre continuaré trabajando en el mismo laboratorio, pero me estaré incorporando a otro gran proyecto que tiene que ver todo con biología molecular. Estaré realizando extracción de DNA, corridas de geles de electroforesis, transfeccion, cultivos de clones, etc… Estas son diferentes técnicas que estaré aprendiendo durante este semestre, ya que aun no domino algunas.  Próximamente nos estarán reuniendo en el laboratorio para realizar el diseño experimental y explicarnos algunas cositas básicas que debemos saber antes de comenzar con la investigación. Me siento muy contenta de poder trabajar en esta área y lo veo como una gran oportunidad, ya que en este mismo laboratorio hay dos grandes proyectos: Cultivo de tejido y Biología Molecular. Ya tuve la oportunidad de trabajar en el área del cultivo de tejido y el poder ampliar mis conocimientos en otra área que desconocía y poder aprender técnicas nuevas, para mí es un reto ya que es completamente distinto a lo que estuve trabajando hasta hace poco. Me encanta mucho la idea de trabajar en la parte molecular y sé que les tendré muy buenas noticias acerca de todo lo que estaré aprendiendo en el laboratorio.

No me había dado cuenta de tantas cosas que he aprendido en el laboratorio. Han sido tantas las técnicas que he aprendido, desarrollado y modificado para desenvolverme sola en mi trabajo.  Han sido mucho los protocolos que he escrito en mi libreta de laboratorio y que ya se me de memoria. Desde preparar una solución de Tripsina o PBS hasta el cuidado de mi cultivo de tejido para realizar los análisis. Han sido muchas las herramientas básicas que he aprendido durante este semestre en el laboratorio que estoy segura que van a ser de gran ayuda en un futuro en escuela graduada.

En cualquier proyecto, trabajo y hasta en los estudios siempre hay obstáculos y retos que afrontar. En mi caso creo que no han sido muchos ya que he contado con la ayuda de mi esposo y compañeros de laboratorio. Para mí, algunas de las barreras que he tenido ha sido el saber administrar el tiempo. Ya que estoy envuelta en mi trabajo, la asociación, la investigación, los estudios y mi casa.  La distribución del tiempo no ha sido fácil ya que todo toma mucho tiempo en especial la investigación. He hecho diferentes ensayos con las células que toman mucho tiempo. He aprendido a mantener un itinerario de las actividades y todo lo que voy a realizar en la semana para así poder organizarme mejor y no desaprovechar el tiempo. También ha sido un gran reto para mí el haber desarrollado el diseño experimental del proyecto y buscar mucha literatura y comprender cada cosa. No fue fácil, ya que al no haber tenido experiencia previa en investigación desconocía de cómo desarrollar el diseño experimental. Por tal razón considero que la comunicación es bien importante, ya que en mi caso pude conversar con mi mentora y el estudiante graduado que me ayuda y pudieron orientar y guiarme. En ningún momento me han dejado sola durante la realización del proyecto.

Aun quedan dos semestres más de nuevos objetivos, retos y obstáculos. Más cosas que aprender y herramientas que aun debemos pulir. Tenemos muchas ideas que vamos a desarrollar y ensayar con el cultivo de tejido. Esperamos poder trabajar con otros metales que están cubiertos con Hidroxiapatita y poder observar la proliferación y adherencia de las células de hueso al metal por medio de la utilización del SEM y Confocal. 

Les deseo mucho éxito a los demás compañeros de BioMinds y que sigan adelante en sus investigaciones. Cada vez desarrollando más y más ideas para aplicar a nuestros proyectos.

MUCHO ÉXITO A TODOS!!!!!!!!